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黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱

产品描述:黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱又称霉菌毒素,是一类无色、 无嗅、无味的化合物。霉菌毒素是霉菌在其所污染的食品中产生的有毒代谢产物。

  • 产品型号

  • 更新时间

    2024-01-25
  • 厂商性质

    代理商
  • 浏览次数

    408
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详细介绍

真菌毒素检测介绍




黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱

真菌毒素:又称霉菌毒素,是一类无色、 无嗅、无味的化合物。霉菌毒素是霉菌在其所污染的食品中产生的有毒代谢产物。
真菌毒素广泛污染农作物、 食品及饲料等植物源产品。不仅能导致农产品霉败变质,营养物质损失,品质降低,更严重的危害是被污染的粮食和饲料将诱发动物以及人 类肿瘤发生。
在我国农产品及饲料中常见的、危害较大的真菌毒素有黄曲霉毒素、呕吐毒素(脱氧雪腐铺刀菌烯醇 )、玉米赤霉烯酮/ZEN、伏马菌素、 猪曲霉毒素A等,这些毒素对农产品及饲料的污染在2002 年被世界卫生组织列为食源性疾病的重要根源。我国相关标准对食品(GB27 61- 2017) 和饲料 (GB 13078-2017) 中的真菌毒素检测都做出了明确的规定,另外2020 版药典也提出了6类真菌毒素在中药检测中的要求。随着社会对食品安全重视越来越强,真菌毒素检测需求持续增加。

真菌毒素检测介绍

真菌毒素免疫亲和柱净化机理

免疫亲和柱利用抗原抗体特异性可逆结合的原理,将毒素杭体与凝胶共价结合,然后填充柱子。将样品提取溶液过 免疫亲和柱,与抗体分子有特异性结合的黄曲霉毒素被固定,而非目标化合物则沿柱流出,再用甲醇将黄曲霉毒素洗脱,根据待测物分子荧光特性, 用高效液相色谱或专用定量荧光速测仪进行定量检测。
    黄曲霉毒素              赫曲毒素            玉米赤霉烯酮         呕吐毒素
    Aflatoxin B1            Ochratoxin A           Zear alenone       Deoxynivalenol

真菌毒素免疫亲和柱

真菌毒素免疫亲和柱免疫亲和柱净化过程(黄曲霉毒素Bl为例)

一,样品制备


参考《GB 5009.22-2016食品安全国家标准食品中黄曲霉凿素B族和G族的测定》。

1, 均质
准确称取20.0g粉碎的样品,加入100ml 70%甲醇 水(体积比)混匀,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min;
2, 提取
提取液用玻璃纤维滤纸过滤或5000r/min离心Smin,取10ml滤液加入20ml水稀释,混匀;
3, 过滤
用快速定性滤纸或玻璃微纤维滤纸或定量滤纸过滤,收集滤液,取15ml

注意:对千样品提取液(pH<6或pH>8)的样品, 需调节pH至中性, 并用玻璃微纤维滤纸/定量滤纸过滤; 对千浑浊难过滤的样品, 可用离心机离心使其分层



二, 黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱样品净化


注意:
整个纯化过程尽量不要让柱子液体流干!

(1)取出免疫亲和层析微柱,将上方塞子取出剪断, 再插回亲和柱上
(2)将柱子与泵流操作架上的玻璃针筒连接固定,去掉亲和柱下方堵头,用15ml水或pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗涤1次,流速1.5ml/min;
(3)将处理后的溶液上样, 使 液体以1.5 ml/min的速度流出;
(4)用15ml水或pH7.4磷酸盐缓冲溶液(PBS)洗涤2次,流速1.5ml/min, 直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体
(5)用1ml甲醇洗脱,用样品瓶/玻璃试管接洗脱液, 流速1ml/min;
(6)脱后液体可用于检测。

真菌毒素免疫亲和柱免疫亲和柱操作示意图

真菌毒素免疫亲和柱

*每盒产品内附产品使用说明


一,注意事项


(1)黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次氯酸钠浸泡过夜。
(2)不要使用过有效期的免疫亲和柱。
(3)免疫亲和柱应在2~8它保存,不要冷冻。
(4) 使用前,免疫亲和柱需至少提前半小时回温至室温(25℃左右)。
(5)样本AFB1含量高千柱容量时,需适当降低上样体积。
(6)必须保证过柱的样品提取液pH在6~8之间,可用盐酸或氢氧化钠调整。
(7)称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整,建议不少于1



保质期


(1)4℃下保存期可长达两年;
(2)生产日期见外包装盒

真菌毒素免疫亲和柱黄曲霉毒素B1的检测

真菌毒素免疫亲和柱

测定条件


色谱柱:Shim-pack GIST C18um, 4.6x250mm
    (P/N: 227-30017-08)
流动相:甲醇:水=45: 55 (V: V)
流速: 1.0 mUmin
检测波长:激发波长360nm , 发射波长440nm
进样量:10 µL
柱温:25℃

HPLC-启动包-1

真菌毒素免疫亲和柱ShimsenIAC产品特点



高度特异性单克隆抗体,具有高吸附能力;

柱容量大,提高了纯化效率;
易洗脱,达到低浓度样本浓缩效果
样品回收率稳定在78 % -9 5 %
样品回收率稳定在78% -95%
样品回收率稳定在78 % -9 5 % 纯化样品适用
于ELISA法,HPLC法等。

ShimsenIAC产品特点


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